Друга информация

СПИСЪК С ИЗПОЛЗВАНИ СЪКРАЩЕНИЯ 6
УВОД 7
ЛИТЕРАТУРЕН ОБЗОР 9

I. Staphylococcus aureus като причинител на заболявания. Резистентност.......
II. Капсула………………..……………...…….......................................................
1. Капсулата като вирулентен фактор.............................................................
2. Биохимична структура на капсулата...........................................................
3. Значение на капсулата за формиране на биофилми...................................
III. Алгинат.............................................................................................................
1. Биохимична структура на алгината............................................................
2. Алгинат лиази...............................................................................................
IV. Клетъчна стена..................................................................................................
1. Биохимичен състав и структура на пептидогликана...............................
2. Особености в структурата на пептидогликана на S. aureus.....................
3. Биохимична структура на тейхоевите киселини при S. aureus................
4. Стафилолитични ензими................................................................................
4.1. Автолизин Atl………………………………..........................................
4.2. Лизостафин................................................................................................
4.2.1. Приложения на лизостафина in vivo..........................................
4.2.2. Резистентност към лизостафин..................................................
4.3. ALE-1…………………………..............................................................
4.4. LytM..…………………………..............................................................
4.5. Стафилолитични ензими, продуцирани от Aeromonas sp……..........
ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ
МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ
А) Материали и методи, използвани за постигане на ЦЕЛ I..…………….

I. Изолиране и пречистване на капсулните полизахариди СР5 и СР8..............
I.1. Агарозна гел-електрофореза...........................................................................
I.2. Полиакриламидна гел-електрофореза (PAGE)..............................................
I.3. Натриево-додецилсулфатна полиакриламидна гел-електрофореза (SDS PAGE)......................................................................................................................
II. Култивиране на бактериални щамове в присъствие на пречистената капсула като единствен въглероден източник. Тест за деградация на капсулата.................................................................................................................
III. Скрининг за откриване на бактериални видове, разграждащи алгинат…………………………………………………………………………….
III.1. Изследване способността на търговски достъпни алгинат лиази за разграждане на капсулните полизахариди..........................................................
III.2. Скрининг на бактериални щамове за алгинат лиазна активност и тест за деградация на алгинат......................................................................................
III.3. Изследване способността на алгинат лиаза-продуциращите щамове за деградация на СР8..................................................................................................
Б) Материали и методи, използвани за постигане на ЦЕЛ II……………
I. Скрининг за микроорганизми със стафилолитична активност......................
II. Идентифициране на стафилолитичните щамове............................................
III. Изолиране на извънклетъчен белтък от стафилолитичните щамове........
IV. Изготвяне на зимограма...................................................................................
V. Спектрофотометрично изследване на стафилолитичната активност на
ензимите.................................................................................................................
VI. Идентифициране на стафилолитичните щамове чрез 16S рДНК PCR…..
VI.1. Екстракция на геномна ДНК........................................................................
VI.2. Полимеразна верижна реакция (PCR)........................................................

РЕЗУЛТАТИ И ОБСЪЖДАНЕ
А) Постигнати резултати по осъществяване на ЦЕЛ I……………………
I. Изолиране и пречистване на капсулните полизахариди CP5 и CP8..………
II. Култивиране на бактериални щамове в присъствие на пречистената капсула като единствен въглероден източник. Тест за деградация на капсулата…………………………………………………………………………
III. Скрининг за откриване на бактериални видове, разграждащи алгинат……………………………………………………………………………
III. 1. Изследване способността на търговски достъпни алгинат лиази за разграждане на капсулния полизахарид СР8…………………………………..
III.2. Скрининг на бактериални щамове за алгинат лиазна активност и тест за деградация на алгинат………………..………................................…………...
III.3. Изследване способността на алгинат лиаза-продуциращите щамове за деградация на капсулния полизахарид СР8…………………………………….
Б) Постигнати резултати по осъществяване на ЦЕЛ II……………………
I. Скрининг за микроорганизми със стафилолитична активност……………..
II. Определяне на макро- и микроморфологията на стафилолитичните щамове....................................................................................................................
III. Изготвяне на зимограма…………………………………………………….
IV. Спектрофотометрично изследване на стафилолитичната активност на ензимите………………………………………………………………………….
V. Идентифициране на стафилолитичните щамове чрез 16S рДНК PCR.…..

ИЗВОДИ
ПРИЛОЖЕНИЕ
БИБЛИОГРАФИЯ
9
14
14
17
19
21
21
22
23
23
24
26
28
29
30
33
34
37
37
38
40
41
41

41
42
43

44


46

47

47

47

48
49
49
49
50
50

51
51
51
52

55
55
55


56

58

58

59

61
62
62

65
66

68
73

75
76
78